Plasmid Miniprep Kit I 250 Preps PD1211-02

Plasmid Miniprep Kit I 250 Preps PD1211-02 kualitas terbaik dan harga murah, produk tersertifikasi kalibrasi Akreditasi KAN. Produk terbaik hanya di BMDStore.COM

Product Description

Plasmid Miniprep Kit I

Buffer A1, B1, N1, KB, DNA Washing Buffer, Elution Buffer, RNase A, ezBind Columns(50), User Manual(1)

Introduction

Kunci dari kit ini adalah sistem pengikatan DNA milik kami yang memungkinkan pengikatan DNA yang dapat dibalik dengan sangat efisien ke kolom mini sementara protein dan kotoran lainnya dihilangkan dengan penyangga pencuci. Asam nukleat kemudian dielusi dengan air steril atau buffer elusi.

Kit ini dirancang untuk pemurnian DNA plasmid yang cepat dan efisien dari 1 hingga 4 mL kultur E. coli. Kolom mini memiliki kapasitas pengikatan DNA plasmid 50 µg. Hasil dari 1 mL kultur biasanya sekitar 8 sampai 12 µg. Plasmid Miniprep Kit II (PD1213), dengan kapasitas pengikatan DNA plasmid 80 µg, direkomendasikan jika menginginkan hasil yang lebih tinggi (> 50 µg).

DNA yang dimurnikan siap untuk aplikasi hilir seperti kloning / subklon, RFLP, sekuensing, dan transfeksi sel yang kuat seperti sel HEK293.

Important Notes

Nomor Salinan Plasmid: Hasil DNA plasmid tergantung pada asal replikasi dan ukuran plasmid. Protokol dioptimalkan untuk pemurnian plasmid nomor salinan tinggi. Untuk plasmid dengan jumlah salinan rendah, volume kultur dan volume buffer perlu ditingkatkan 2 kali. Silakan hubungi layanan pelanggan kami untuk informasi lebih lanjut dan referensi Tabel 1 untuk plasmid yang umum digunakan.

Tabel 1 Plasmid yang umum digunakan dan hasil yang diharapkan.

Plasmid

Origin

Copy Numbers

Expected Yield(µg per 1 mL)

pSC101

pSC101

5

0.1-0.2

pACYC

P15A

10-12

0.4-0.6

pSuperCos

pMB1

10-20

0.4-1

pBR322

pMB1

15-20

0.6-1

pGEMR

Muted pMB1

300-400

6-7

pBluescriptR

ColE1

300-500

6-8

pUC

Muted pMB1

500-700

8-12

Strain Inang: Strain yang digunakan untuk menyebarkan plasmid memiliki pengaruh yang signifikan terhadap hasil. Strain inang seperti Top 10 dan DH5a menghasilkan DNA plasmid berkualitas tinggi. strain endA + seperti JM101, JM110, HB101, TG1 dan turunannya, biasanya memiliki hasil plasmid yang rendah karena endonuklease endogen atau karbohidrat tinggi yang dilepaskan selama lisis. Kami merekomendasikan untuk mengubah plasmid menjadi strain akhir jika hasil tidak memuaskan. Silakan lihat Tabel 2 untuk informasi akhirA.

Table 2 endA strains of E. Coli.

EndA- Strains of E. Coli

DH5α

DH1

DH21

JM106

JM109

SK2267

SRB

XLO

TOP10

DH10B

JM103

JM107

SK1590

MM294

Stbl2TM

XL1-Blue

BJ5182

DH20

JM105

JM108

SK1592

Select96TM

Stbl4TM

XL10-Gold

EndA+ Strains of E. Coli

C600

JM110

RR1

ABLE® C

CJ236

KW251

P2392

BL21(DE3)

HB101

TG1

TB1

ABLE® K

DH12STM

LE392

PR700

BL21(DE3)pLysS

JM101

JM83

TKB1

HMS174

ES1301

M1061

Q358

BMH 71-18

All NM  strains

All Y strains

Massa Sel Optimal (OD600 x mL Kultur): Prosedur ini dirancang untuk mengisolasi plasmid yang ditumbuhkan dalam media LB standar (Luria Bertani) selama 12-16 jam hingga kepadatan OD600 2.0 hingga 3.0. Jika media kaya seperti TB atau 2xYT digunakan, pastikan kepadatan sel tidak melebihi 3.0 (OD600). Rasio tinggi biomassa di atas buffer lisis menghasilkan hasil dan kemurnian DNA yang rendah. Kolom mini memiliki biomassa optimal 10-15. Misalnya, jika OD600 adalah 3,0, volume kultur optimal harus 1-5 mL. Untuk jumlah sel yang berlebihan, kurangi biomassa atau naikkan volume Buffer A1, B1 dan N1.

Volume Kultur: Gunakan labu atau tabung dengan volume 4 kali lebih besar dari media kultur untuk memastikan kondisi optimal untuk pertumbuhan bakteri. Jangan melebihi volume kultur maksimum yang disarankan dalam protokol. Lisis yang tidak lengkap karena jumlah kultur bakteri yang berlebihan menghasilkan hasil yang lebih rendah dan kemurnian yang lebih rendah.

Storage and Stability

Buffer A1 harus disimpan pada suhu 4 ° C setelah RNase A ditambahkan. Semua bahan lainnya dapat disimpan pada suhu kamar (22-25 ° C). Umur simpan yang dijamin adalah 12 bulan sejak tanggal pembelian.

Before Starting

Persiapkan semua komponen dan persiapkan semua bahan yang diperlukan dengan memeriksa buklet petunjuk ini dan menjadi terbiasa dengan setiap langkah dan memberi perhatian khusus pada yang berikut,

Important

  • RNase A: 20 mg/mL. It is stable for more than half a year when stored at room temperature. Spin down RNase A vial briefly. Add the RNase A solution to Buffer A1 and mix well before use. Store at 4°C.
  • Add 8 mL (PD1211-00) or 60 mL (PD1211-01) or 96 mL (PD1211-02) or 60 mL (PD1211-03) 96-100% ethanol to each DNA Wash Buffer bottle before use.
  • Buffer B1 precipitates below room temperature. It is critical to warm up the buffer at 50°C to dissolve the precipitates before use.
  • Keep the cap tightly closed for Buffer B1 after use.
  • Ensure the availability of centrifuge capable of 13,000 rpm.
  • Carry out all centrifugations at room temperature.

Materials supplied by user

  • High speed microcentrifuge or Vacuum manifold.
  • 96-100% ethanol.
  • 1.5 mL microcentrifuge tubes

MORE INFO :
——————————————
Website : www.bmdstore.com
No Kantor : 021-2943 2095
No HP : 0813 1122 7684 (WA)
Email : [email protected]

Reviews

There are no reviews yet.

Be the first to review “Plasmid Miniprep Kit I 250 Preps PD1211-02”