Product Description
Oligo (dT) 20 (50 μM) , Hexamers acak (50 ng / μl) , 10? Buffer RT * , 25 mM MgCl2 ,0,1 M DTT , 10 mM dNTP mix , SuperScript. III RT (200 U / μl), RNaseOUT. (40 U / μl), E. coli RNase H (2 U / μl), Air yang diolah DEPC, Total HeLa RNA (10 ng / μl), Sense Control Primer (10 μM), Antisense Control Primer (10 μM) Sistem Sintesis Untai Pertama untuk RT-PCR dioptimalkan untuk mensintesis cDNA untai pertama dari poli (A) + atau RNA total yang dimurnikan. Target RNA dari 100 bp hingga> 12 kb dapat dideteksi dengan sistem ini. Jumlah bahan awal dapat bervariasi dari 1 pg hingga 5 μg dari total RNA. Reverse Transcriptase adalah versi M-MLV RT yang telah direkayasa untuk mengurangi aktivitas RNase H dan memberikan peningkatan stabilitas termal. Enzim ini digunakan untuk mensintesis cDNA pada kisaran suhu 42-55 ° C, memberikan peningkatan spesifisitas, hasil cDNA yang lebih tinggi, dan produk yang lebih panjang daripada transkriptase balik lainnya. Karena Sistem Sintesis untuk RT tidak dihambat secara signifikan oleh ribosom dan transfer RNA, ia dapat digunakan untuk mensintesis cDNA untai pertama dari total persiapan RNA. Sintesis cDNA dilakukan pada langkah pertama menggunakan RNA total atau poli (A) + – RNA terpilih dengan oligo (dT), primer acak, atau primer spesifik gen. Pada langkah kedua, PCR dilakukan secara terpisah
Penyimpanan dan Stabilitas
Simpan pada -20 ° C , Sistem Sintesis Untai Pertama untuk RT-PCR stabil selama 1 tahun bila disimpan pada -20 ° C. Kontrol kualitas Minimal 25 ng produk RT-PCR 353-bp diperoleh dari 100 pg total HeLa RNA dan primer β-aktin manusia. Minimal 25 ng produk RT-PCR 6,8 kb diperoleh dari 500 ng total HeLa RNA dan primer Pol ε manusia.
Kit Contents
Contents |
Volume |
Oligo(dT)20 (50 μM) |
20 μl |
Random hexamers (50 ng/μl) |
100 μl |
10× RT buffer* |
400 μl |
25 mM MgCl2 |
200 μl |
0.1 M DTT |
100 μl |
10 mM dNTP mix |
100 μl |
SuperScript. III RT (200 U/μl) |
20 μl |
RNaseOUT. (40 U/μl) |
40 μl |
E. coli RNase H (2 U/μl) |
20 μl |
DEPC-treated water |
480 μl |
Total HeLa RNA (10 ng/μl) |
8 μl |
Sense Control Primer (10 μM) |
10 μl |
Antisense Control Primer (10 μM) |
10 μl |
MORE INFO :
——————————————
Website : www.bmdstore.com
No Kantor : 021-2943 2095
No HP : 0813 1754 7882
Email : [email protected]